佐藤 Toshiyaチーム『Am J Physiol レグル インテグラ コンプ Physiol』定期刊行物のこの記事研究内容：通過ウラタン.麻酔（ウレタンエチル）そして交感神経切除の 2 型糖尿病ラットと非糖尿病ラットの検討2 型糖尿病に関連する耳下腺副交感神経血管拡張機能の損傷と唾液分泌の減少との関連を分析し、三大主要唾液腺（耳下腺、顎下腺、舌下腺）の血流動力学と唾液分泌の関係と潜在機序を分析した。

要約

レーザースポットイメージングと唾液収集の方法により、ウラタン.麻酔をかけて交感神経を切除した 2 型糖尿病ラットと非糖尿病ラットにおいて、三大主要唾液腺の血流動力学と唾液分泌との関係を研究した。糖尿病ラットと非糖尿病ラットでは、舌神経刺激は腺血流量を急速に増加させ、三大腺体の唾液分泌を誘導することができる。糖尿病ラットの耳下腺の血流量増加幅と唾液分泌量は、非糖尿病ラットと比較して明らか低下するしかし、顎下腺、舌下腺など他の腺体ではこのような現象は観察されなかった。アセチルコリン静注は用量依存的に耳下腺血流量を増加させることができるが、糖尿病ラットのこの反応は非糖尿病ラットより低かった。同様に、糖尿病ラットの耳下腺にもM1 型和M3ムスカリンアセチルコリン受容体（mAChR)のmRNA の発現レベルも非糖尿病ラットより相対的に低かった。私たちの研究結果によると、2 型糖尿病は耳下腺の副交感神経血管拡張機能と唾液分泌機能を損ない、コリンエネルギー血管拡張通路の乱れが副交感神経媒介の腺血管拡張機能を損なう潜在的なメカニズムの一つである可能性を示唆する。

実験材料と機器

（一）実験材料

実験動物

◦2 型糖尿病モデルラット：8-10週齢（糖尿病前期）と45-50週齢（慢性糖尿病期）の雄OLETF胆嚢収縮素（CCK）-1 受容体の欠乏は多食を招き、しかも多性遺伝子とテストステロンの制御によって誘発される2 型糖尿病

◦非糖尿病対照ラット：同い年の雄レイトラット

実験薬

◦麻酔関連：イソフルラン、ウラタン.

◦筋弛緩剤：ブロモアミンプラム、

◦神経伝達物質及び溶媒：アセチルコリン、無菌生理食塩水、

◦分子生物学的試薬：トリゾール/mRNA試薬、FastStart Essential DNA グリーン マスター、対象M1-M5 mAChR和β-アクチン（β-アクチン)の特異的プライマーを含むことができる。

（二）実験機器

1. 血流測定器

オメガウェイブ OZ-2型レーザースポット血流イメージャ：採用780nm半導体レーザーによる腺への拡散照射により2次元血流マップを取得そして組み合わせによるパレットソフトウェア解析の対象領域の血流信号

オメガウェイブ フロ-C1レーザードップラー血流計：下唇左側の血流変化を監視するために用いられ、すべての記録はゼロ血流電気校正を行い、血流変化は任意の単位（A.U。)が表示されます。

オメガウェイブ フロ-C1レーザドップラー血流計

オメガウェイブ OZ-2型レーザスポット血流イメージャ

ラットの電気刺激部位、血流測定部位及び唾液収集方法の概略図

A：刺激部位は舌神経（LN）の中枢切断端を有している。

B、C：血流測定部位：B図レーザスポットイメージング技術を用いた耳下腺の測定（PG)、下顎下腺（SMG）及び舌下腺（SLG)の血流、C図はレーザードップラー血流計（LDF）下唇の血流を測定した。

D：唾液分泌記録方法：ポリエチレンカテーテルを通じてウォートン管を通じて唾液を収集する、口の中に綿球を置いて唾液を集める、湿度測定装置を用いて粘膜湿度値を測定した。

生理パラメータ監視機器

小電極型血糖分析計、人工呼吸器、赤外線分析器、電子刺激器

唾液と粘膜湿度測定器

湿度測定器、ポリエチレン管、予備秤量綿球、精密天秤。

じっけんてじゅん

1. 動物準備と麻酔管理

2. 体重と血糖測定

実験前にラットを絶食した 15 時間、イソフルオロアルカン麻酔後に体重を秤量した、尾静脈採血約20μLを選択し、Antsense デュオ血糖分析器は空腹血糖を測定し、サンプルごとに測定する2 二次平均値。

3. 腺血流と血管伝導率検査

ラットの水平臥位、オメガウェイブ フロ-C1レーザドップラー血流計3つの唾液腺にレーザー光を照射し、オメガウェイブ OZ-2型レーザスポット血流イメージャ散乱光を採取して元のスペックル画像を生成する（赤血球数を反映/速度）、LDF下唇左側血流をモニターした。

糖尿病ラット（固体円、1群あたりのサンプル量 n=6）と非糖尿病ラット（中空円、1群あたりのサンプル量n=6）の糖尿病前期及び糖尿病慢性期におけるオメガウェイブ OZ-2型レーザスポット血流イメージャ腺体及び下唇の静止血流を測定する [任意の単位（A.U。）]

4. 舌神経刺激とアセチルコリン投与

5. 唾液分泌と口腔粘膜湿度測定

6. リアルタイムRT-PCR検出mAChR mRNA表現

7. とうけいてきかいせき

実験的結論

2 型糖尿病は主に耳下腺の副交感神経血管拡張機能と唾液分泌機能を損ない、顎下腺、舌下腺への影響は小さい、コリンは血管拡張通路の乱れ（特にM1 型、M3 mAChR発現低下）は耳下腺副交感神経媒介の血流増加損傷の潜在的な機序であり、腺血流動力学異常は糖尿病関連口乾症（ゼロストミア)が発生します。