DAS型シリーズ二波長低圧液体クロマトグラフィー分離クロマトグラフィーシステム

低圧液体クロマトグラフィー分離クロマトグラフィーシステムの適用範囲：生物化学、合成化学、天然産物、薬物開発、食品化学、農業化学、化粧品、ポリマーと石化などの業界の科学研究と製造。イオン交換クロマトグラフィー、アフィニティークロマトグラフィーゲル濾過クロマトグラフィー、疎水作用クロマトグラフィーなどの方法を行うことができ、蛋白質、酵素、核酸、ヌクレオチド、ポリペプチド、（芳香族アミノ酸を含む/含まない）及びその他の紫外吸収のある生物/非生物サンプルの分離分析、流動測定に用いられ、生物分子の精製の理想的な選択であり、それは機能が多く、使用が簡便で、経済的であるなどの特徴を有する。コンパクトなデザインで、冷凍庫や実験室のスペースを最大限に節約します。

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システム構成における高性能2ビーム紫外線検出器の各技術指標の要求は、全国の製薬工場で使用される薬物の出荷定量検査のためのものである。計器設備の特徴

蛋白質280 nm/254 nm二波長測定

タンパク質分子には、共役二重結合のチロシン、ロイシンなどの芳香族アミノ酸が含まれる。これらは紫外光を吸収する性質を持っており、その吸収ピークは280 nm波長であり、この波長内の吸収ピークの光密度値はその濃度に比例するため、蛋白質の定性、定量測定の根拠とすることができ、だからこそ、280 nmにおける紫外吸収法は通常クロマトグラフィーシステムにおける蛋白質濃度の連続的な監視に用いられる。しかし、各種蛋白質のチロシンとトリプトファンの含有量が異なるため、正確に定量するには、測定すべき蛋白質の純物を基準として比較する必要があり、あるいはその消衰係数を参考としてすでに知っている必要がある。また、多くの非蛋白質物質は280 nm波長でも-定吸収能力があり、干渉が発生する可能性がある。中でも特に核酸（プリンとピリミジン塩基）の影響が深刻である。280 nmでの吸収はタンパク質より10倍強い（グラム当たり）が、

254 nmでの核酸の吸収はより強く、その吸収ピークは254 nm付近である。核酸254 nmにおける消衰係数は280 nmにおける2倍であるが、蛋白質では逆に280 nm紫外吸収は254 nmにおける吸収値よりも大きい。

通常

純蛋白質の光吸収比：A 280/A 254”1.8

純核酸の光吸収比：A 280/A 254《0.5》

そのため、蛋白質溶液中に核酸が同時に存在する場合（生物系のほとんどがそうである）、OD 254 nmとOD 280 nmを同時に測定しなければならない。そして、2種類の波長の吸収度の比に基づいて、経験式によって補正し、核酸の影響を除去してタンパク質の真の含有量を推定した。

タンパク質濃度＝1.45×A 280－0.74×A 254（mg/ml）

この経験式は、異なる濃度比で知られているタンパク質（酵母エノラーゼ）と核酸（酵母核酸）の混合液の一連の測定データによって構築された。

システムの構成