液体クロマトグラフィーの基本的な動作原理は、サンプル中の各成分の固定相と流動相間の分配係数の違いに基づいて分離を実現する。混合試料を液体クロマトグラフィーシステムに注入すると、流動相（水、メタノール、アセトニトリルなどの液体溶媒）とともに固定相（シリカゲル、化学結合相、ポリマーなどの多孔質粒子材料）が入ったクロマトグラフィーカラムに入る。異なる成分と固定相との間の相互作用力（吸着、分配、排除、親和など）に差があるため、固定相における滞留時間もそれぞれ異なる。具体的には、固定相との相互作用が弱い成分は、移動相に従って移動する速度が速く、先にカラムを流出する、一方、固定と密接に結合した成分は、移動速度が遅く、カラムから流出します。このプロセスにより、混合物中の各成分は1つずつ分離される。また、分離効果は2相間の溶質の分配係数の違い（熱力学的要因）に依存するだけでなく、拡散係数、固定相粒度、カラム充填状況及び移動相流速などの動力学的要因の影響を受ける。

液体クロマトグラフィーの使用上の注意：

1.移動相の選択と処理

-HPLC級またはそれ以上の溶媒を選択し、水は二次蒸留水または超純水を必要とし、現在配合し、微生物繁殖汚染システムを防止する。

−温度差による性能不安定を回避するために、流動相調製後に室温に戻して使用する必要がある。

-緩衝塩溶液を使用する場合は、ろ過し、使用前後に流路を純水で洗浄し、緩衝塩溶液を流路に残して静置することを禁止しなければならない。同時に、カラムはまず低割合有機相（有機相含有量が5以上）で洗浄し、さらに高割合有機相で保存し、緩衝塩の析出を避ける必要がある。高濃度リン酸緩衝塩（>10 mmol/L）の使用は極力避ける。

−純アセトニトリルを流動相として使用することを極力回避し、アセトニトリル重合による液吸着を防止する。非使用の場合は茶色のボトルを使用して保管することをお勧めします。

2.操作規範

-高圧管路接続部ではベルト圧状態での取り外しが禁止されている。

-流速を調整するときは、圧力と温度の急激な変化を回避し、柱内のフィラーに衝撃を与えないように注意してください。

−試料溶液の溶媒組成を測定する際には段階的に行うべきであり、特に逆相クロマトグラフィーでは、有機溶媒を直接純水に置換したり、逆にしたりしてはならない。

-紫外線検出器の光源がオフになったら、30分冷却してから電源を切る必要があります。

3.安全保守

-廃液は分類収集する必要があり、有機廃液は直接排出してはならない。

-注入針の洗浄、ガスケットの交換など、定期的に機器のメンテナンスを行う。