自動細胞計数器を検証する方法：検証スライドを使用するメリット

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1 はじめに

自動細胞計数器は、迅速かつ正確に細胞計数結果を提供できることで人気がある。これらの利点があるにもかかわらず、信頼性の高い細胞計数結果を確実にするためには、その正確性を検証することが重要である。マイクロスフェアは、フローサイトメータや自動細胞計数器などの装置を検証するためによく使われている。しかし微小球の使用には様々な問題があり、検証のためのスライドの細胞計数器検証の開発を促したてんせいLUNA™細胞計数器シリーズ。

本文では、細胞計数基準を検討し、細胞計数器を用いてスライドを検証するてんせいLUNA™細胞計数器シリーズの利点。

2 国際細胞計数基準

ISO 20391規格の制定は、正確な細胞計数に指導を提供し、細胞計数結果の信頼性を確保するためである。この基準は、一連の希釈実験により細胞計数測定の品質を検証するための方案を概説し、参考材料がない場合にこの方案を使用することができる。しかし、このプロセスは時間も複雑である可能性があり、決定係数と比例係数を決定するために複雑な計算を行う必要があります。

この課題を克服するために、測定のトレーサビリティを確保し、比較を容易にし、測定プロセスを検証するために参照材料を使用することを提案します。有効な方法は、複雑な計算を行う必要がないように、平均分析結果を証明書付き参照材料から得られた参照値と比較することです。それでも、適切な参考材料の選択は課題に直面しています。

3参考材料としての検証マイクロスフェアの使用の課題

米国国立標準技術研究所（NIST）微小球などの検証微小球は、粒径やカウントに関するさまざまな分析方法の参考材料としてよく使用されている。これらの微小球は既知の大きさと濃度を有し、フローサイトメトリー、顕微鏡検査、その他の類似技術の較正基準としてよく用いられる。しかし、NIST微小球には蛍光形態がなく、細胞の活力をテストするのには適していない。

代替として市販の蛍光微小球を用いることができるが、ピペット中の誤差や長期保存中の蒸発が精度に影響する可能性があり、注意深く処理し、繰り返し試験する必要がある。そのため、現在、細胞の活力評価に使用できる商用参考材料はありません。

独自に内部で参照材料を作成することを選択したユーザーは、比較的正確ではなく、大量のサンプルを必要とする手動カウントに依存しなければなりません。あるいは、カウント結果を得ることに挑戦的である可能性があるが、この方法はユーザ操作にあまり便利ではない。そのため、代替的な細胞活力評価方法を見つける必要がある。

4基準材料として検証スライドを使用する

安定性と一貫性のある参照材料の使用は、細胞計数の正確な結果を確保するために重要である。このような品質制御レベルを提供することができる選択は、検証スライドを使用することである。これらのスライドは、試料装填による濃度変化、貯蔵中の蒸発または分布不均一などの問題を解消するために既知の数の物体を有する予め点滅されたパターンまたは予め固定された蛍光微小球を含む。

さらに、検証スライドは、細胞計数器の明視野及び蛍光光学系を用いて全細胞計数及び細胞活性を検証することを可能にする。他の機器との交差検証も簡単であり、長期保存や繰り返し使用しても測定値が一致するように安定性が確保されています。検証スライドを使用することで、研究者は正確性を確保するために追加の実験を行うために使用されていた時間とリソースを節約することができます。

（A） 細胞計数器によるスライドの検証——明場II型（B）細胞計数器によるスライドの検証——蛍光型

5スライド評価の精度を検証するために細胞計数器を使用する方法

細胞計数器はスライドを検証する方案を提供することにより、簡単で効率的な代替微小球の方法を提供し、細胞計数器の正確性を検証する過程を簡略化し、改善した。この方法は時間を節約し、細胞計数結果の正確性を検証する簡便な方法を提供する。

細胞計数器を使用してスライドスキームを検証するには、次の簡単な手順に従います。

1) 検査細胞計数器はスライドラベル上の細胞濃度と細胞活力値を検証した。

2) スライドガラスを細胞計数装置に挿入した。

3) 「IQOQ」スキームを使用してカウントを開始します。

4) 総細胞濃度と細胞活力値を記録した。

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