Elisa実験：Elisa曲線問題

ELISA実験で曲線に問題が発生したのは、大半が標準品、操作、設備が十分ではなかった。核心結論：標曲問題は通常標準品の処理、添加操作または孵化条件に出て、これらの段階を重点的に検査することで迅速に位置決めすることができる。

一、標準曲線がよくないよくある原因

標準品の溶解と希釈は適切ではない

標準品粉末が十分に溶解していないか、希釈時に混和していないため、濃度が不正確になっている。

提案：説明書に従って指定希釈液を用い、溶解後短時間遠心分離し、勾配希釈時に新しい銃頭を用いて、吹き付けまたは渦混合する。

サンプリング操作が不正確である

ピペットが校正されていないか、あるいはサンプリング速度、角度が一致せず、孔間の体積差が大きい。

提案：定期的に移液器を校正し、サンプリング時に垂直、平穏で、銃頭は液面に貼るが底に触れず、気泡を避ける。

インキュベーション条件が一定ではない

封板膜がないか、蓋が厳密でないため、エッジ効果を引き起こす、温度時間が不安定である。

提案：高品質封板膜、酵素標準板を用いて恒温培養器を置き、自然培養を避ける。

二、その他の一般的な曲線問題と対策

全体的に低い

可能な原因：試薬の期限切れ、標準品が溶解していない、液を終了した後すぐに検査していない、試薬を混合して使用している。

提案：説明書に従って試薬を保存し、標準品は溶解前に遠心分離し、希釈液を加えた後、静置して混合し、液を終了した後、直ちに検査する。

信号なし

可能な原因：試薬の期限切れ、HRP酵素汚染、操作ミス（サンプル添加順序が間違っている）。

提案：試薬ラベルを検査し、新鮮な蒸留水で緩衝液を配合し、試薬の室温は30分間平衡する。

全体的に高すぎる

可能な原因：酵素スケールの光密度範囲が広すぎ、作動液濃度が高く、インキュベーション時間が長い/温度が高い。

提案：光密度範囲は0-3.5とし、作動液は現在配合し、インキュベーションタンクの温度は37±0.5℃に制御する。

三、最適化提案

標準品処理鄒：溶解前に遠心分離し、希釈液を加えた後、静置混合する。

サンプリング操作：移液器を校正し、サンプリングを加えて垂直に安定し、気泡を避ける。

インキュベーション条件：封板膜で密封し、酵素標準板を恒温インキュベーション器に入れる。

設備検査：定期的に移液器を校正し、酵素標準器は正確な光密度範囲を設定する。

注：以上は参考に供するだけで、本製品は科学研究に供するだけで、実際のデータとしてではなく、実験は厳格に説明に従ったり、技術教師に相談したりしなければならない。

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