植物1，5−二リン酸核ケトグルコシルカルボキシラーゼ（RuBisCO）ELISA検出キット技術説明書

BS-4938植物1,5-二リン酸コアケトン糖カルボキシラーゼ（RuBisCO）ELISAキット96 T/48 T

製品概要

本キットは、植物組織、細胞及び関連液体サンプル中の核ケトース−1、5−ジリン酸カルボキシラーゼ/オキシゲナーゼ（RuBisCO）の活性をinvitroで定量的に検出するために使用される。この酵素は植物光合成カルヴィン循環の鍵となる酵素であり、その活性は光合成速度と光呼吸過程に直接影響する。本キットは二抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着法（ELISA）を採用し、高感度と特異性を有する。

けんしゅつげんり

キットは二重抗体一段階サンドイッチ法を用いた：

RuBisCO単抗に抗するミクロ多孔質プレートによってプリパックされた捕捉試料中の標的酵素

HRP標識を添加した検出抗体は「抗体−抗原−酵素標識抗体」複合体を形成する

洗浄後、TMB発色基質を添加

反応終了後、酵素スケールは450 nm波長で吸光度（OD値）を測定した

サンプル中のRuBisCO濃度はOD値と正の相関を示した

キット組成

成分仕様保存条件

プリパック被微孔板12×8孔4℃

標準品（6つの濃度勾配）0.3 mL×6管-20℃

酵素標準抗体15 mL 4℃

20×洗浄緩衝液50 mL室温

TMB発色液A/B各15 mL 4℃遮光

終止液15 mL室温

サンプル希釈液30 mL 4℃

サンプル処理

組織サンプル

組織0.1 gを秤量し、抽出液1 mLの氷浴ホモジナイズを加えた

10000 g 4℃10分間遠心分離

上澄み液を採取して直ちに検査または-80℃で保存する（繰り返し凍結融解を避ける）

細胞サンプル

細胞沈殿物を収集し、抽出液を加えて分解する

10000 g 4℃10分間遠心分離

上澄み液を採取して検査する

血清/液体サンプル

室温2時間または4℃で一晩静置

1000 g遠心分離20分

上澄み液を採取して検査する

注意事項：

試料溶血の回避

NaN 3はHRP活性を抑制する

新鮮なサンプルを優先し、凍結保存サンプルは繰り返し凍結融解を避ける

操作手順

準備試薬：すべての試薬を室温（20〜25℃）まで使用前に平衡化する

加様‌：

標準品穴：50μL異なる濃度標準品

サンプル穴：50μL測定対象サンプル

空白穴：追加しない

インキュベーション：1ウェル当たり100μL酵素標的抗体を添加し、37℃で60分間光を避けて反応させる

洗浄：1穴に350μLの洗浄液を加え、1分間静置した後に乾燥させ、5回繰り返す

発色性：1ウェルあたり50μLの基質AとBを添加し、37℃で15分間遮光反応

終止鄒：穴ごとに50μL終止液を添加する

測定：15分以内に酵素スケールで450 nm OD値を測定する

結果の計算

標準品濃度を横軸とし、OD値を縦軸として標準曲線を描く

サンプルOD値から標準曲線上の濃度を調べる

サンプル濃度＝測定濃度×希釈倍数（あれば）

パフォーマンス指標

検出範囲：18-650 U/L

感度：≤5 U/L

バッチ内変異係数：10%未満

バッチ間変異係数：15%未満

注意事項

キット有効期間6ヶ月、2-8℃保存

異なるロット番号の試薬は混用できない

発色液の遮光保存

洗浄不良は偽陽性を引き起こす

終止液は腐食性物質を含み、操作時に保護が必要である

すべての廃棄物は生物危害物によって処理される

必要な機器

酵素スケール（450 nmフィルタ）

精密ピペット（0.5-1000μL）

37℃恒温タンク

洗濯機（オプション）

うずまきミキサ

注：科学研究に使用するために、以上の資料は参考に供して、実験の根拠としてではありません、具体的には技術の先生あるいはブランドの商に問い合わせてください。

天津本生は品質管理を企業の生命と見なし、企業競争力の向上を追求してきた。会社は経営の中で一貫して承諾している：規律を守り、法を守り、自分を厳しく律し、寛仁は待ち、勇敢に引き受ける企業精神を標準とし、硬すぎる品質と優れたサービスで市場を維持し、開拓し、顧客の需要を最大限に満たす。お客様とのウィンウィンは、私たちの発展目標です。