微生物リグニン（Lignin）ELISA検査キット技術説明書

BS-5184微生物リグニン（Lignin）ELISAキット

1.製品の概要

本キットは二抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着法（ELISA）を採用し、微生物発酵液、細胞分解液などのサンプル中のリグニン含有量の定量測定に専用する。リグニンは微生物が植物細胞壁を代謝または分解する過程で発生する芳香族ポリマーであり、その含有量の変化は微生物のリグノセルロースの利用効率を反映することができる。

2.検出原理

固相抗体パッケージは、ミクロ多孔質プレートによってサンプル中のリグニンを捕捉し、酵素標識検出抗体を加えて「抗体−抗原−酵素標識抗体」複合体を形成する。洗浄後、TMB基質を添加して発色させ、450 nm波長で吸光度を測定し、吸光度値はリグニン濃度と正の相関を示した。

3.キット組成

成分96穴構成48穴構成保存条件

ミクロポア酵素スケールプレート12穴×8条12穴×4条2-8℃密封乾燥

標準品（リグニン）0.5 mL×6管0.5 mL×6管-20℃遮光

サンプル希釈液6 mL 3 mL 2-8℃

酵素標準抗体-HRP 10 mL 5 mL 2-8℃遮光

20×洗浄緩衝液25 mL 15 mL室温

TMB発色液9 mL 4.5 mL 2-8℃遮光

終止液9 mL 4.5 mL室温

封板膜2枚2枚の室温

4.サンプル処理

4.1微生物発酵液

8000×g遠心10分間で菌体を除去

上澄み液を採取して直ちに検査または-80℃で凍結保存（繰り返し凍結融解を避ける）

4.2細胞分解液

超音波破砕後12000×g遠心分離15分

上澄み液を取ってPBSで10倍希釈した後に検査する

4.3注意事項

試料の濁りは0.22μmろ過膜ろ過が必要である

アジドナトリウム含有試料の使用回避（HRP活性抑制）

5.実験手順

5.1試薬の準備

洗浄緩衝液：蒸留水を20倍から1×作動液に希釈する

標準品勾配：説明書に従って0-60μg/mLに希釈する

5.2サンプリング

標準品/サンプル各50μLに対応する微孔を添加

37℃で30分間インキュベート

5.3洗浄

1穴に300μLの洗浄液を加え、1分間静置してから乾燥させる

5回繰り返す

5.4発色

1ウェル当たり酵素標的抗体100μL、37℃で30分間インキュベート

洗浄後TMB発色液90μLを加え、15分間遮光

停止液添加50μL停止反応

5.5測定

450 nm波長測定OD値（基準波長630 nm）

6.結果計算

標準品濃度を横軸、OD値を縦軸に標準曲線を描画します。サンプル濃度は曲線方程式により計算し、範囲を超えて希釈して再測定する必要がある。

7.性能指標

パラメータ指標

感度≤0.5μg/mL

測定範囲1-60μg/mL

精度バッチ内CV<8%、バッチ間CV<12%

回収率85～115%

8.注意事項

キットを使用する前に室温で30分間平衡させる必要がある

異なるロット番号の試薬は混用できない

終止液は強酸を含み、操作時に防護装備を着用する

発色液は金属イオンとの接触を避ける

微量ピペットは交差汚染を避けるために較正する必要がある

9.有効期間

6ヶ月（2-8℃保存）

10.宣言

本製品は科学研究用にのみ使用されている。

注：以上は参考に供するだけで、本試薬は科学研究用に供するだけで、実際のデータとしてではなく、実験は厳格に説明に従ったり、技術教師に相談したりしなければならない。

微生物リグニン（Lignin）ELISA検査キット技術説明書本生は品質制御を企業の生命と見なし、企業競争力の向上を追求してきた。会社は経営の中で一貫して承諾している：規律を守り、法を守り、自分を厳しく律し、寛仁は待ち、勇敢に引き受ける企業精神を標準とし、硬すぎる品質と優れたサービスで市場を維持し、開拓し、顧客の需要を最大限に満たす。お客様とのウィンウィンは、私たちの発展目標です。ネイティブ！信頼できるパートナー。私たちはあなたと誠実に協力して、美しい未来を作りたいと思っています。ブンゼンキット