ヒトインターロイキン23（IL-23）ELISA検出キット技術説明書

BS-0194ヒトインターロイキン23（IL-23）ELISAキットネイティブキット

一、製品の概要

本キットは二抗体サンドイッチ酵素結合免疫吸着試験（ELISA）技術を採用し、ヒト血清、血漿、組織ホモジナイズ及び細胞上清中のインターロイキン23（IL-23）濃度の定量測定に専用する。鄒コアコンポーネントは、抗体をプリパックした酵素スケールプレート、標準品、ビオチン標識検出抗体及び発色基質（TMB）を含み、高感度（0.15 pg/mL未満）と特異性を確保する。実験の全行程は約3.5時間で、科学研究実験に適用し、臨床診断用途を厳禁する。‌

二、検査原理

抗体結合鄒：IL-23と前包被捕捉抗体が結合して複合体を形成する。‌

ビオチン化検出抗体及びワサビペルオキシダーゼ標識ストレプトアビジンを加え、酵素反応により発色させた。

定量分析：TMB基質の発色後、液終止反応を中止し、450 nm波長測定吸光度値、IL-23濃度はOD値と正の相関を示した。‌

三、キット組成

｜成分｜仕様/数量｜保管条件｜

|-||-|

｜プリパック被酵素スケールプレート｜96ウェル/プレート｜2-8℃遮光｜

｜標準品（凍結乾燥粉）｜2本｜－20℃長期保存｜

｜ビオチン標識抗体｜1本（濃縮液）｜2-8℃短期｜

｜発色基質（TMB）｜12 mL｜2-8℃遮光｜

｜終止液｜12 mL｜室温｜

｜20×洗浄液｜50 mL｜室温｜

注：サンプル希釈液はサンプルタイプ（血清/血漿/細胞上清）によって専用希釈液を選択する必要がある。

四、サンプル処理

血清/血漿鄒：室温で30分間凝固し、1000×gで15分間遠心分離し、上澄み液を取って溶血を避ける。

細胞上清：直接遠心分離して細胞破片を除去し、未測定サンプルは分装後-20℃で保存し、繰り返し凍結融解を避ける必要がある。

組織ホモジネート：組織重量に応じて溶解液ホモジネートを添加した後、遠心分離して清を取る。‌

五、操作手順

試薬平衡：すべての成分を室温で20分間静置し、洗浄液水浴を濃縮して結晶を溶解する。‌

添加反応：

標準品の勾配を希釈した後、酵素標識孔を添加し、サンプル体積は25μLであった。‌

検査抗体、酵素標的複合体を順次添加し、37℃で60分間インキュベートした。

洗浄発色：洗浄液を3回洗浄し、TMB基質を加えて15分間遮光反応を行い、液を終了した。‌

読数：酵素スケール450 nm波長測定OD値、四パラメータフィッティング計算濃度。

六、性能パラメータ

測定範囲：15.6-1000 pg/mL（線形区間）。

感度：0.15 pg/mL。

精密度：板内/板間変異係数（CV）<10%‌

回収率：80%～120%。

七、注意事項

安全防護：操作時に手袋、ゴーグルを着用し、終止液及びTMB基質に接触しないようにする。‌

試薬保存鄒：試薬キットを開けていない2-8℃は6ヶ月保存でき、-20℃は1年保存でき、オープンした試薬は7日以内に使い切る必要がある。

実験仕様：

異なるロットの試薬は混合を禁止する。‌

洗浄時に酵素スケールプレートをたたいて、吸水紙が直接穴に接触しないようにします。‌

発色反応には遮光が必要で、終了後30分以内に読み取ります。

注：以上は参考に供するだけで、実際のデータとしてではなく、実験は厳格に説明に従ったり、技術教師に相談したりしなければならない。