ラット大豆配糖体（Daidzein）ELISA検出キット説明書

BS-8567ラットダイズゼイン（Daidzein）ELISAキット

製品概要

本キットは競合性酵素結合免疫吸着法（ELISA）を採用し、ラット血漿、血清または組織均質などの生物サンプル中のダイズヌクレオチド（Daidzein）含有量の定量測定に専用する。大豆配糖体は天然イソフラボン類化合物であり、抗酸化、抗炎症及び免疫調節などの生物活性を有し、マメ科植物に広く存在し、その含有量の測定は薬理学研究と栄養評価にとって極めて重要である。本キットは抗原−抗体特異的結合原理に基づき、酵素標識信号増幅により高感度検出を実現し、実験室の通常分析に適している。

キット組成

予備包被微孔板：96孔（12条×8孔）、板条は取り外し可能で、ダイズグリコシド特異性抗体を包被する。

標準品：6つの濃度勾配（0.13–61.02 ng/mL）、凍結乾燥粉末、使用前に標準品希釈液で再溶解する。

酵素標識物：ワサビペルオキシダーゼ（HRP）標識の競争抗原、茶色避光保存。

発色基質：TMB溶液、無色透明液体。

停止液：反応を停止するための2 M硫酸溶液。

洗浄液：20×濃縮緩衝液は、脱イオン水で希釈して使用する必要がある。

サンプル希釈液：サンプル濃度を検査範囲に調整するために使用する。

封板膜：2枚、微孔板シール用。

説明書：1部。

ちょぞうじょうけん

未開封キット：2-8°C遮光保存、有効期間12ヶ月。

開封後：標準品、酵素標識物及び発色基質は分装凍結保存（-20°C）し、繰り返し凍結融解を避ける、微孔板は乾燥密封保存されている。

濃縮洗浄液の凍結を禁止し、結晶析出を防止する。

サンプル処理

血漿/血清サンプル：採取後直ちに遠心分離（3000 rpm、10分）し、上澄み液を採取し、−80°Cで保存した。溶血を避ける。

組織ホモジネート：組織を秤量し、生理食塩水（1：9 w/v）ホモジネートを加え、遠心分離して上澄み液を取る。

注意事項：サンプル中のダイズヌクレオチドは結合状態で存在する可能性があり、β-グルクロンアルデヒド酸酵素加水分解を使用して検査感度を高めることを提案する。試料が濁っている場合は遠心分離（5000 rpm、10分間）または濾過（0.22μm膜）が必要である。

実験手順

1.試薬準備

洗浄液：20×濃縮液を脱イオン水で1×（例えば10 mL濃縮液＋190 mL水）に希釈する。

標準品勾配：標準品希釈液を用いて凍結乾燥標準品を再溶解し、勾配を0.13、0.39、1.17、3.51、10.53、61.02 ng/mLに希釈する。

試料希釈：試料希釈液を用いて測定対象試料を測定範囲内に希釈する（事前実験により希釈倍数を決定することを提案する）。

2.添加とインキュベーション

各ウェルに100μLの標準品またはサンプルを添加する（空洞にサンプル希釈液のみを添加する）。

穴ごとに50μLの酵素マーカーを加え、軽く振って混ぜます。

37°C光を避けて60分間インキュベートした。

3.洗濯

穴内の液体を捨て、穴ごとに350μLの洗浄液を加え、30秒間静置した後に振って乾かし、5回繰り返し、たたいて乾かした。

4.発色と終了

1ウェル当たり100μLの発色性基質を添加し、37°C遮光で15分間インキュベートした。

穴ごとに100μLの終止液を加え、軽く振って混ぜます。

5.測定

直ちに酵素スケールを用いて450 nm波長で吸光度（OD値）を測定し、基準波長は630 nmであった。

結果の計算

標準曲線の描画：標準品濃度（ng/mL）を横軸とし、OD値を縦軸とし、4パラメータ論理曲線に適合する（専門ソフトウェアの使用を推奨する）。

サンプル濃度計算：サンプルOD値に基づいて標準曲線方程式に代入し、希釈倍数を乗じて実際の濃度を得る。

パフォーマンスパラメータ

感度：検出限界0.13 ng/mL。

精度：板内変異係数（CV）<10%、板間CV<15%。

回収率：80～120%（検証方法：標準回収実験）。

線形範囲：0.13–61.02 ng/mL、相関係数r²≧0.98。

特異性：染料リグニンなどの類似構造化合物との交差反応率は5%未満である。

注意事項

操作規範：酵素標識物と発色基質が金属イオンに接触することを避ける、発色後30分以内に測定し、信号減衰を防止した。

品質管理：各ロットの実験には標準曲線と品質管理サンプル（高、中、低濃度を推奨）を含める必要がある。

安全防護：液が強酸を含むことを中止し、手袋とゴーグルを着用して操作する必要がある。

廃棄物処理：酵素含有廃棄物は不活化処理を経てから廃棄する必要がある。

FAQ

信号が低い：インキュベーション時間または温度が不足していないかどうかを検査する、洗浄手順が十分であることを確認する。

高い背景値：洗浄不またはサンプルマトリックス干渉のため、洗浄回数を増やすか、サンプル前処理を最適化することを提案する。

標準曲線異常：標準品を再溶解する時、気泡が濃度の正確性に影響を与えないように十分に混合しなければならない。

注：本製品は科学研究用のみであり、実験根拠としてはならない。具体的な操作は実際のキット説明書に準じてください。

ラット大豆配糖体（Daidzein）ELISA検査キット天津本生は品質管理を企業の生命と見なし、企業競争力の向上を追求してきた。会社は経営の中で一貫して承諾している：規律を守り、法を守り、自分を厳しく律し、寛仁は待ち、勇敢に引き受ける企業精神を標準とし、硬すぎる品質と優れたサービスで市場を維持し、開拓し、顧客の需要を最大限に満たす。お客様とのウィンウィンは、私たちの発展目標です。ネイティブ！信頼できるパートナー。私たちはあなたと誠実に協力して、美しい未来を作りたいと思っています。ブンゼンキット